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蛋白质沉淀常用方法
来源:国家医学考试网  点击:4  日期:2017-10-09 

蛋白质沉淀常用方法

概念:蛋白质从溶液中析出的现象称为沉淀。

常用的方法:
 
1.盐析:在蛋白质溶液中若加大量中性盐,蛋白质胶粒的水化层即被破坏,其所带电荷也被中和,蛋白质胶粒因失去这两种稳定因素而沉淀。此种沉淀过程称为盐析。常用的中性盐有硫酸铵、硫酸钠和氯化钠等。盐析沉淀的蛋白质不发生变性是其优点,缺点是沉淀的蛋白质中混有大量中性盐,必须经透析除去。

2.重金属盐沉淀蛋白质:重金属离子如Ag十、Hg2+、Cu2十、Pb2十等,可与蛋白质的负离子结合,形成不溶性蛋白质沉淀。沉淀的条件为pH稍大于蛋白质的pI为宜。

3.生物碱试剂与某些酸沉淀蛋白质:生物碱试剂如苦味酸、鞣酸、钨酸等以及某些酸,如三氯醋酸、磺酸水杨酸、硝酸等,可与蛋白质的正离子结合成不溶性的盐沉淀。沉淀的条件是pH﹤PI. 4)有机溶剂沉淀蛋白质:可与水混合的有机溶剂,如酒精、甲醇、丙酮等能与蛋白质争水,破坏蛋白质胶粒的水化膜,使蛋白质沉淀析出。在常温下,有机溶剂沉淀蛋白质往往引起变性。






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